流式細(xì)胞儀是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的分析儀器，能夠高效地對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他微小顆粒進(jìn)行快速、定量的多參數(shù)分析。它結(jié)合了流體力學(xué)、光學(xué)原理以及計(jì)算機(jī)技術(shù)，通過對(duì)細(xì)胞的大小、顆粒結(jié)構(gòu)、表面標(biāo)志物等特征進(jìn)行分析，能夠?yàn)檠芯咳藛T提供極為豐富的信息。具有高通量、高靈敏度、實(shí)時(shí)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域。
1.細(xì)胞懸浮液的制備：
細(xì)胞樣本通常需要在使用前進(jìn)行分散成單個(gè)細(xì)胞懸液。這是因?yàn)榧?xì)胞儀通過流動(dòng)的液流將細(xì)胞逐一引入檢測通道。細(xì)胞懸液的質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。
2.流動(dòng)通道與單細(xì)胞對(duì)齊：
采用了狹窄的流動(dòng)通道，利用流體動(dòng)力學(xué)原理確保細(xì)胞懸液中的細(xì)胞按順序逐一經(jīng)過激光束。每個(gè)細(xì)胞通過激光照射時(shí)，都會(huì)產(chǎn)生不同的光散射和熒光信號(hào)。
3.光散射與熒光檢測：
通過激光束照射流動(dòng)的細(xì)胞，并通過前向散射光（FSC）和側(cè)向散射光（SSC）來測定細(xì)胞的大小和形態(tài)。前向散射光代表細(xì)胞的大小，側(cè)向散射光反映細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)復(fù)雜性，如顆粒數(shù)量和形態(tài)。
除了光散射信號(hào)，還可利用熒光標(biāo)記物對(duì)細(xì)胞表面、細(xì)胞內(nèi)或核內(nèi)特定分子進(jìn)行標(biāo)記。當(dāng)這些標(biāo)記物被激光激發(fā)時(shí)，細(xì)胞會(huì)發(fā)出熒光信號(hào)，可精確檢測這些信號(hào)并分析不同的熒光顏色。通過對(duì)不同熒光信號(hào)的分析，研究人員可以同時(shí)檢測到多個(gè)細(xì)胞特征，如表面抗原的表達(dá)、細(xì)胞周期的變化、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度等。
4.信號(hào)處理與數(shù)據(jù)分析：
信號(hào)檢測系統(tǒng)能夠快速獲取每個(gè)細(xì)胞的多項(xiàng)數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)隨后會(huì)傳送到計(jì)算機(jī)進(jìn)行處理和分析。分析軟件根據(jù)預(yù)設(shè)的參數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)篩選、聚類和統(tǒng)計(jì)分析，最終生成各種圖形和統(tǒng)計(jì)報(bào)告。這些數(shù)據(jù)可以幫助研究人員對(duì)細(xì)胞群體的特征進(jìn)行深度分析，如不同細(xì)胞群體的分布、表型特征的差異等。
流式細(xì)胞儀的關(guān)鍵技術(shù)：
1.多參數(shù)分析：
傳統(tǒng)的細(xì)胞分析技術(shù)通常只能分析單一參數(shù)，如細(xì)胞大小或顆粒性。而細(xì)胞儀則能夠同時(shí)分析多個(gè)參數(shù)，能夠提供更為全面的細(xì)胞信息。例如，研究人員可以通過多重?zé)晒鈽?biāo)記分析細(xì)胞表面不同抗原的表達(dá)，從而獲取細(xì)胞的多個(gè)表型特征。
2.高通量檢測：
檢測速度極快，通常每秒鐘可對(duì)數(shù)千個(gè)細(xì)胞進(jìn)行分析。這使得細(xì)胞儀能夠進(jìn)行大規(guī)模的細(xì)胞分析，并且在短時(shí)間內(nèi)獲得大量數(shù)據(jù)，特別適用于需要高通量分析的研究領(lǐng)域，如癌癥免疫治療、干細(xì)胞研究等。
3.細(xì)胞排序：
一些具備細(xì)胞分選功能。細(xì)胞分選技術(shù)能夠根據(jù)細(xì)胞的熒光標(biāo)記或其他特征，將細(xì)胞分離成不同的群體并收集起來。這項(xiàng)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于純化特定細(xì)胞亞群、分離干細(xì)胞、免疫細(xì)胞等。
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更新時(shí)間：2025-08-19 
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